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熒光定量PCR儀是一種廣泛應(yīng)用于基因檢測(cè)、病原體檢測(cè)、食品安全等領(lǐng)域的生物檢測(cè)設(shè)備。它利用熒光標(biāo)記技術(shù),對(duì)PCR擴(kuò)增過(guò)程中的目標(biāo)DNA進(jìn)行實(shí)時(shí)定量分析,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。然而,在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中,背景信號(hào)的干擾常常影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文將介紹熒光定量PCR儀在檢測(cè)時(shí)如何減少背景信號(hào)的干擾,提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。一、背景信號(hào)的產(chǎn)生原因1.擴(kuò)增產(chǎn)物污染:在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,擴(kuò)增產(chǎn)物可能會(huì)污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,導(dǎo)致背景信號(hào)的產(chǎn)生。2.熒光標(biāo)記物泄漏:熒光標(biāo)記物在PCR反...
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愚公生物作為國(guó)內(nèi)為數(shù)不多的國(guó)產(chǎn)酶制造商,生產(chǎn)的限制性?xún)?nèi)切酶、PCR系列酶、逆轉(zhuǎn)錄系列酶和蛋白工程酶等工具酶在多種實(shí)驗(yàn)中都有應(yīng)用。限制性?xún)?nèi)切酶:DNA指紋識(shí)別和分析擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP)甲基化分析疫苗研發(fā)生產(chǎn)基因測(cè)序和SNP鑒定ddPCRPCR系列酶:分子克隆基因表達(dá)分析基因分型測(cè)序和突變克隆突變甲基化逆轉(zhuǎn)錄系列酶:逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)定量RT-PCR(RT-qPCR)cDNA克隆和文庫(kù)構(gòu)建蛋白工程酶:蛋白質(zhì)表達(dá)和純化蛋白質(zhì)功能研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析蛋白質(zhì)相互作用研...
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血液是人體內(nèi)的一種液體組織,它在人體中扮演著多種關(guān)鍵角色,包括運(yùn)輸氧氣、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和廢物,同時(shí)還有調(diào)節(jié)體溫、免疫防御等功能。血液主要由血漿和血細(xì)胞組成。血液可以被替代嗎?今天我們來(lái)聊聊一個(gè)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的熱門(mén)話題——血液替代品。我們都知道,血液對(duì)于我們的生命至關(guān)重要。它不僅負(fù)責(zé)將氧氣和養(yǎng)分輸送到全身各個(gè)器官,還能清除代謝廢物。然而,血液資源有限,且輸血過(guò)程中存在風(fēng)險(xiǎn)。因此,開(kāi)發(fā)血液替代品成為解決血液短缺和輸血風(fēng)險(xiǎn)的重要途徑。血液替代品主要分為兩大類(lèi):合成血液和生物血液。合成血...
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高壓滅菌鍋是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、制藥、食品等領(lǐng)域的重要滅菌設(shè)備。在使用過(guò)程中,驗(yàn)證高壓滅菌鍋的滅菌效果主要在于確定高壓滅菌鍋是否達(dá)到所需的滅菌溫度和時(shí)間,一般情況下有三個(gè)關(guān)鍵參數(shù)需要注意,即:平衡時(shí)間、維持時(shí)間和滅菌時(shí)間。平衡時(shí)間:這是從參考測(cè)量點(diǎn)到達(dá)平衡溫度所需的時(shí)間。在高壓蒸汽滅菌器中,平衡時(shí)間不應(yīng)超過(guò)15秒(對(duì)于容積不大于800L的滅菌器)或30秒(對(duì)于容積更大的滅菌器)。維持時(shí)間:這是滅菌室內(nèi)參考測(cè)量點(diǎn)及負(fù)載各部分的溫度保持在滅菌溫度范圍內(nèi)的時(shí)間。維持時(shí)間的長(zhǎng)短與滅菌...
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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)是一種在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)初始模板進(jìn)行定量分析的方法。該技術(shù)于1996年由美國(guó)AppliedBiosystems公司推出,它的出現(xiàn)解決了傳統(tǒng)PCR不能對(duì)初始模板定量分析的問(wèn)題。熒光定量PCR具有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),目前已廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。熒光定量PCR原理在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,熒光信...
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